Схема очистки фермента от балластных веществ сводится к освобождению его от нерастворимых веществ, сопутствующих растворимых веществ и других ферментов. Процессы получения очищенных препаратов из поверхностных и глубинных культур несколько различны. Из поверхностных культур труднее получить высокоочищенные препараты из-за большого количества балластных веществ. Из глубинных культур получить очищенные препараты несколько легче, но при этом приходится вести выделение из разбавленных растворов, если выделение ферментов проводится из жидкой части культуры. Выделение осложняется, если фермент внутриклеточный, и тогда необходимо разрушать клетки микроорганизмов.
Принципиальную схему выделения и очистки ферментов из глубинных и поверхностных культур микроорганизмов можно представить в виде следующей схемы.
Из схемы ясно, что экстракт из поверхностной культуры или фильтрат культуральной жидкости является исходным материалом для получения препаратов ферментов различной степени очистки. На первом этапе выделения отходом процесса является нерастворимая часть культуры – биошрот, содержащий нерастворимые включения среды и биомассу продуцента.
|
Таблица 1 | ||||||||||
|
Стадии очистки |
Объём, мл |
Общее количество белка, мг |
Глюкоамилаэная активность |
Амилолитическая активность |
Трансглюкоэидазиая активность* | |||||
|
общая, ед. |
удельная, ед./мг белка |
выход,% |
степень очистки |
общая, ел. |
выход,% | |||||
|
Исходная культуральная жидкость |
1 200 |
13 600 |
28 500 |
2,1 |
100,0 |
1,0 |
9 500 |
100 |
Глюкоза,изомальтоза, | |
|
Отделение биомассы, концентрирование, отделение |
560 |
11 100 |
25 600 |
2,3 |
90,0 |
1,1 |
8 500 |
89,00 |
То же | |
|
Осаждение ацетоном, растворение в воде |
350 |
2 040 |
19 800 |
9,7 |
69,5 |
4,6 |
1 050 |
11,30 |
» | |
|
Ультрафильтрация |
55 |
1 610 |
18 200 |
11,3 |
64,0 |
5,4 |
860 |
9,10 |
» | |
|
Хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе |
555 |
298 |
15 000 |
50,4 |
52,5 |
24,5 |
30,0 |
0,35 |
Нет | |
|
Ультрафильтрация |
16 |
250 |
13 450 |
54,0 |
47,2 |
25,7 |
27,5 |
0,29 |
» | |
|
Гельфильтрование через акрилекс П-100 |
100 |
140 |
11 400 |
76,5 |
40,35 |
36,5 |
22,8 |
0,24 |
» | |
|
Обессоливание, лиофилизация |
0,1** |
92 |
7 150 |
77,0 |
25,0 |
37,0 |
14,3 |
0,15 |
» | |
|
* ** |
Характеризуется хроматографически по наличию изосахаров. Выряжено в г. | |||||||||
Статьи и публикации:
Дряблая кожа и уход за ней
Дряблая кожа отличается бледным цветом, незначительным салоотделением, пониженной упругостью, растянутыми порами, склонностью к образованию морщин. Она теряет упругость и обвисает.
При дряблой коже необходимо применять раздражающие и вяж ...
Фракционирование клеточного содержимого
При осторожном применении методов разрушения некоторые органеллы сохраняются в интактном состоянии (ядра, минтохондрии, апарат Гольджи, лизосомы
и пероксисомы). Таким образом, суспензия клеток превращается в растворимый экстракт, содержащ ...
Время мифов
Вначале представления о мире у наших предков не слишком отличались от представлений о той местности, в которой они жили. Разве что мир казался покрупнее. Горы — больше домов и хижин. А могучие реки — шире и обильнее ручейков, питавших пол ...