Биология » Структура и состав биологических мембран » Критерии чистоты мембранных фракций

Критерии чистоты мембранных фракций
Страница 1

Пожалуй, наиболее объективным критерием чистоты выделенной мембранной фракции является присутствие в ней какого-либо уникального компонента, который содержится только в этой мембране или является в ней преобладающим. Обычно такими компонентами служат ферменты, которые в данном случае называют маркерами. Список маркерных ферментов, которые используются для контроля чистоты мембранных фракций, приведен в табл.1.2 При определении активности фермента следует принимать во внимание, что он может находиться в латентной форме, например благодаря тому, что локализуется на внутренней поверхности выделяемых мембранных везикул. Другие проблемы, связанные с оценкой чистоты выделенных мембран, рассмотрены в обзоре. Следует отметить, что рекомендуемые методы в большинстве случаев достаточно хорошо отработаны и стандартизованы.

В ряде случаев более удобными мембранными маркерами являются не ферменты, а специфические рецепторы лектинов, гормонов, токсинов или антител. Если изучаемые системы хорошо охарактеризованы, то о чистоте мембранной фракции можно судить по ее белковому составу, определяемому с помощью электрофореза в полиак-риламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия. Например, наружная мембрана грамотрицательных бактерий имеет характерный набор полипептидов, которых нет в цитоплазматической мембране.

Таблица 1.2 Маркеры, используемые для контроля чистоты мембранных фракций, выделяемых из клеток млекопитающих "

Мембранная фракция

Маркерный фермент

Плазматические мембраны

5 '-Нуклеотидаза

Щелочная фосфодиэстераза

Na */К+-АТРаза (базолатераль-

ная мембрана эпителиальных

клеток)

Аденилатциклаза (базальная

мембрана гепатоцитов)

Аминопептидаза (мембрана

щеточной каемки эпителия)

Митохондрии (внутренняя

Цитохром с-оксидаза

мембрана)

Сукцинат-цитохром с-оксидо-

редуктаза

Митохондрии (наружная

Моноаминооксидаза

мембрана)

Лизосомы

Кислая фосфатаза

0-Галактозндаза

Пероксисомы

Каталаза

Уратоксидаза

Оксидаза D-аминокислот

Мембраны аппрата

Галактозилтрансфераза

Гольджи

Эндоплазматический

Глюкозо-6-фосфатаза

ретикулум

Холинфосфотрансфераза

NADPH-цитохром с-оксидо-

редуктаза

Цитозоль

Лактатдегидрогеназа

Страницы: 1 2

Статьи и публикации:

Иммунная система организма человека
Центральные и периферические органы иммунной системы Иммунная системы человека обеспечивает специфическую защиту организма от генетически чужеродных молекул и клеток, в том числе инфекционных агентов – бактерий, вирусов, грибов, простейши ...

Вывод
Биологическим нанокомпьютерам предстоит еще очень долгий путь к тому, чтобы стать сколько-нибудь практической технологией. Однако недавняя работа группы израильских исследователей, опубликовавших статью в журнале Nature (Y. Benenson, T. P ...

Роль наследственной изменчивости в эволюции видов и ее формы
В эволюционной теории Дарвина предпосылкой эволюции является наследственная изменчивость, а движущими силами эволюции — борьба за существование и естественный отбор. При создании эволюционной теории Ч. Дарвин многократно обращается к резу ...

Разделы