Биология » Структура и состав биологических мембран » Критерии чистоты мембранных фракций

Критерии чистоты мембранных фракций
Страница 1

Пожалуй, наиболее объективным критерием чистоты выделенной мембранной фракции является присутствие в ней какого-либо уникального компонента, который содержится только в этой мембране или является в ней преобладающим. Обычно такими компонентами служат ферменты, которые в данном случае называют маркерами. Список маркерных ферментов, которые используются для контроля чистоты мембранных фракций, приведен в табл.1.2 При определении активности фермента следует принимать во внимание, что он может находиться в латентной форме, например благодаря тому, что локализуется на внутренней поверхности выделяемых мембранных везикул. Другие проблемы, связанные с оценкой чистоты выделенных мембран, рассмотрены в обзоре. Следует отметить, что рекомендуемые методы в большинстве случаев достаточно хорошо отработаны и стандартизованы.

В ряде случаев более удобными мембранными маркерами являются не ферменты, а специфические рецепторы лектинов, гормонов, токсинов или антител. Если изучаемые системы хорошо охарактеризованы, то о чистоте мембранной фракции можно судить по ее белковому составу, определяемому с помощью электрофореза в полиак-риламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия. Например, наружная мембрана грамотрицательных бактерий имеет характерный набор полипептидов, которых нет в цитоплазматической мембране.

Таблица 1.2 Маркеры, используемые для контроля чистоты мембранных фракций, выделяемых из клеток млекопитающих "

Мембранная фракция

Маркерный фермент

Плазматические мембраны

5 '-Нуклеотидаза

Щелочная фосфодиэстераза

Na */К+-АТРаза (базолатераль-

ная мембрана эпителиальных

клеток)

Аденилатциклаза (базальная

мембрана гепатоцитов)

Аминопептидаза (мембрана

щеточной каемки эпителия)

Митохондрии (внутренняя

Цитохром с-оксидаза

мембрана)

Сукцинат-цитохром с-оксидо-

редуктаза

Митохондрии (наружная

Моноаминооксидаза

мембрана)

Лизосомы

Кислая фосфатаза

0-Галактозндаза

Пероксисомы

Каталаза

Уратоксидаза

Оксидаза D-аминокислот

Мембраны аппрата

Галактозилтрансфераза

Гольджи

Эндоплазматический

Глюкозо-6-фосфатаза

ретикулум

Холинфосфотрансфераза

NADPH-цитохром с-оксидо-

редуктаза

Цитозоль

Лактатдегидрогеназа

Страницы: 1 2

Статьи и публикации:

Возрастные особенности строения и функционирования зрительного анализатора
Ребенок рождается видящим, но четкое, ясное видение у него еще не развито. В первые дни после рождения движения глаз у детей не координированы. Так, можно наблюдать, что у ребенка правый и левый глаз двигаются в противоположных направлени ...

Грацильные австралопитеки
Приблизительно с 4 млн лет назад палеонтологическая летопись становится достаточно полной и последовательной. В Кении, Танзании и Эфиопии во множестве местонахождений открыты окаменелости грацильных австралопитеков, названные Австралопит ...

Обмен веществ в нейроне
Основной особенностью обмена веществ в нейроне является высокая скорость обмена и преобладание аэробных процессов. Потребность мозга в кислороде очень велика (в состоянии покоя поглощается около 46мл/мин кислорода). Хотя вес мозга по отно ...

Разделы