Выделение ферментов
Страница 1

На основе культуральной жидкости, содержащей внеклеточные протеиназы, можно получить ферментные препараты различной степени очистки, используя разнообразные методы (см. рис. 1) – начиная от высушивания распылением готовой культуральной жидкости и до методов получения высокоочищенных ферментных препаратов и кристаллических протеиназ. Механические беговые дорожки Спортивный город Екатеринбург.

В таблице 4 представлены основные этапы выделения высокоочищенной протеиназы из технического препарата Г3х. Эта схема позволяет получить с высоким выходом (до 22 %) очищенный препарат внеклеточной нейтральной протеиназы из В. subtilis, которая относится к металлопротеиназам.

Таблица 4

Стадия выделения

Характеристика стадии

Выход активной протеиназы, % от исходной

Протосубтапин Г3х

Исходный материал для выделении протеазы

100

Растворение

Растворение протосубтилина в воде с рН 7,8 до концентрации сухого вещества 10 %

92

Отделение нерастворимой части

Фильтрование

88

Концентрирование

Очистка ультрафильтрацией и концентрирование до содержания белка в концентрате 3,5 – 4,0 %

84

Освобождение от пигмента

Обесцвечивание на ДЭАЭ-целлюлозе

82

Фракционирование ферментного комплекса

Хроматография на КМ-целлюлозе

44

Концентрирование элюата, получаемого при хроматографии

Обессоливание и концентрирование методом ультрафильтрации

38

Получение сухого высокоочищенного препарата нейтральной протеиназы

Сублимационная сушка концентрата

22

Дальнейшие исследования протеолитических ферментов этого микроорганизма позволили установить в них четыре компонента, которые различались между собой по многим физико-химическим характеристикам (табл. 4), особенно по оптимуму рН. Из таблицы 6 видно, что протеиназа II обладает широким диапазоном действия в интервале рН от 7,5 до 11, протеиназа IV является сильнощелочной и т. д.

Таблица 6

Компонент протеиназ

Молекулярная масса

Изоэлектрическая точка, pI

Оптимальный рН

рК

Кин, с-1

I

44 000

8,4

7,0

5,3; 8,8

0,9·10-3

II

40 000

8,8

7,5 – 11

5,7; 9,3; 9,8; 12,2

4,0·10-5

III

23 000

9,5

6,5

5,3; 7,7

3,3·10-4

IV

29 000

10,1

11,0

8,5

2,0·10-4

Страницы: 1 2 3

Статьи и публикации:

Выводы
Итак, можно сделать такие выводы: · Кожа бывает: - нормальной; - сухой; - жирной; - комбинированной; - чувствительной. · Нормальной кожей хотел бы обладать любой из нас. Это очень большая редкость. Такая кожа мягкая, эластичная, с ...

Назвать оболочки, входящие в состав биосферы и их границы
Перечислить компоненты биосферы. (Оформить в виде таблицы) Биосфера – это область распространения жизни, включающая наряду с организмами и среду их обитания. Оболочка биосферы. Компоненты биосферы. Литосфера Жизнь сконцент ...

Дискретные модели циклов жизни
Важные свойства систем, элементы которых претерпевают индивидуальное развитие, могут быть изучены даже на простых дискретных моделях. В простейшем случае жизненный цикл состоит только из двух стадий – молодость и зрелость, которые мы обоз ...

Разделы