Табл. 3
Качественный и количественный состав аминокислот, выделенных из белковых гидролизатов B. methylicum
|
протонированный гидролизат гидролизат, полученный 98% 2H2О и 2% [U-2Н ]метанола | ||
|
Глицин |
8.03 |
9.69 |
|
Аланин |
12.95 |
13.98 |
|
Валин |
3.54 |
3.74 |
|
Лейцин |
8.62 |
7.33 |
|
Изолейцин |
4.14 |
3.64 |
|
Фенилаланин |
3.88 |
3.94 |
|
Тирозин |
1.56 |
1.82 |
|
Аспарагиновая кислота |
7.88 |
9.59 |
|
Глутаминовая кислота |
11.68 |
10.38 |
|
Лизин |
4.37 |
3.98 |
|
Гистидин |
3.43 |
3.72 |
|
Треонин |
4.81 |
5.51 |
|
Метионин |
4.94 |
2.25 |
|
Аргинин |
4.67 |
5.27 |
Аминокислота Содержание в белке, % от сух. веса 1 г биомассы
TTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTВследствие того, что используемые в работе бактериальные штаммы были представлены их ауксотрофными по определенным аминокислотам формами, было необходимо оценить сколько данных аминокислот содержится в гидролизатах биомассы и каковы уровни их дейтерированности. В гидролизате биомассы, полученной с 2H2O-среды было зафиксировано небольшое снижение содержания лейцина, изолейцина, глутаминовой кислоты, лизина и метионина по сравнению с биомассой, полученной на обычной воде (табл. 3). Содержания аланина, аспарагиновой кислоты, треонина и аргинина в дейтерированном белке, напротив, немного превышают контрольные показатели, снятые в Н2О. Таким образом, достигнутый результат в опытах по адаптации B. methylicum к 2H2О, позволил использовать гидролизаты его (2Н)меченой биомассы, полученной в ходе многоступенчатой адаптации к 2H2О в качестве ростовых субстратов для выращивания бацилл Bacillus subtilis, а также штамма галофильных бактерий Halobacterium halobium. При этом, показателем, позволяющим надеяться на высокую эффективность включения дейтерия в продукты, синтезируемыми данными бактериальными штаммами, служит высокий уровень дейтерированности аминокислот суммарного белка этих бактерий, измеренный на метиловых эфирах DNS-производных аминокислот, за исключением лейцина и метаболически родственных с ним аминокислот, сниженные уровни дейтерированности которых объясняются эффектом ауксотрофности данного метилотрофного штамма в лейцине (табл. 4).
Табл. 4
Уровни дейтерированности аминокислот суммарных белков B. methylicum, полученных в ходе многоступенчатой адаптации к 2H2O
|
Метиловые эфиры дансилпроизводных аминокислот |
Величина молекулярного иона (М+) |
Количество включенных атомов дейтерия |
Уровень дейтерированности аминокислот, % | ||
|
Dns-Gly-OMe |
324.0 |
1.8 |
90.0 | ||
|
Dns-Ala-OMe |
340.3 |
3.9 |
97.5 | ||
|
Dns-Val-OMe |
368.5 |
4.0 |
50.0 | ||
|
Dns-Leu-OMe (Dns-Ile-OMe) |
383.4 |
4.9 |
49.0 | ||
|
Dns-Phe-OMe |
419.6 |
7.6 |
95.0 | ||
|
Dns-Tyr-OMe |
668.5 |
6.5 |
92.8 | ||
|
Dns-Ser-OMe |
354.8 |
2.6 |
86.6 | ||
|
Dns-Thr-OMe |
- |
- |
не определяли | ||
|
Dns-Met-OMe |
- |
- |
не определяли | ||
|
Dns-Asp-OMe |
396.4 |
2.0 |
66.6 | ||
|
Dns-Glu-OMe |
411.0 |
3.5 |
70.0 | ||
|
Dns-Lys-OMe |
632.4 |
5.3 |
58.9 | ||
|
Dns-Arg-OMe |
- |
- |
не определяли | ||
|
Dns-Нs-OMe |
- |
- |
не определяли |
Статьи и публикации:
Использование внутриклеточных электродов
Для изучения отдельных клеток необходимо использовать методы более чувствительные, чем ЯМР. Один из них основан на подходе, разработанном электрофизиологами для изучения разности потенциалов и тока на плазматической мембране. С этой целью ...
Значение и общий план строения нервной системы
Биологической основой психической деятельности является нервная система, представленная сложной структурой нервных образований в организме человека и позвоночных животных. Работа нервной системы обеспечивает контакты с внешним миром; реал ...
Основные положения теории эволюции Ж.-Б. Ламарка
Признание приспособительных изменений организмов, под воздействием новых условий, существование разновидностей (промежуточные формы между видами), изменения организмов в процессе одомашнивания, отличия ископаемых форм от современных, - в ...